一、炎症的概述

   炎症（Inflammation）是指具有血管系统的活体组织对致炎因子所发生的的防御。炎症，就是平时人们所说的“发炎”，是机体对于刺激的一种防御反应，表现为红、肿、热、痛和功能障碍。炎症，可以是感染引起的感染性炎症，也可以不是由于感染引起的非感染性炎症。通常情况下，炎症是有益的，是人体的自动的防御反应，但是有的时候，炎症也是有害的，例如对人体自身组织的攻击、发生在透明组织的炎症等。

1、炎症主要分类

   从炎症的主要组织变化可分类如下：

（1）变质性炎症。

（2）渗出性炎症（浆液性炎、纤维素性炎、化脓性炎、出血性炎、坏死性炎、卡他性炎）。

（3）增生性炎症。

（4）特异性炎症（结核、梅毒、麻疯、淋巴肉芽肿等）

2、炎症的原因

   任何能够引起组织损伤的因素都可成为炎症的原因，即致炎因子（inflammatory agent）。包括生物性因子、物理性因子、化学性因子、坏死组织、变态反应和异物等。

3、炎症的局部表现

   以体表炎症时最为显著，常表现为红、肿、热、痛和功能障碍。

4、炎症的全身反应

   炎症病变主要在局部，但局部病变与整体又互为影响。在比较严重的炎症性疾病，特别是病原微生物在体内蔓延扩散时，常出现明显的全身性反应。如发热、白细胞增多、单核吞噬细胞系统细胞增生、实质器官的病变。

二、 炎症相关的生物标志物

（1）降钙素原（PCT）

   降钙素原（PCT）是降钙素的前体，是一种无激素活性的糖蛋白。其中半衰期为25-30小时，在体内外稳定性很好，不受体内激素水平影响。严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高，反映了全身炎症反应的活跃程度，在局部有限的细菌感染、轻微感染和蛮慢性炎症时不会升高。是广泛运用于临床的抗感染项目，对于抗生素的使用具有很强的监控作用。

（2）C-反应蛋白（CRP）

   C-反应蛋白（CRP）是机体受到微生物入侵或感染、组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的急性相蛋白。激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，清除入侵机体的病原微生物和损伤，坏死，凋亡的组织细胞。CRP在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用，传统观点认为CRP是一种非特异的炎症标志物，但近十年的研究揭示了CRP直接参与了炎症与动脉粥样硬化等心血管疾病，并且是心血管疾病强有力的预示因子与危险因子。

（3）人血清淀粉样蛋白A（SAA）

   人血清淀粉样蛋白A（SAA）是急性时相反应蛋白中的一种正反应蛋白，分子量12000。它的生物学功能是脂质代谢、炎症防御及免疫应答。正常人的血液中SAA的含量是以痕量存在的，当机体被细菌或病毒感染后在白介素6、白介素1及肿瘤坏死因子的刺激下由肝脏分泌，SAA呈现升高趋势，所以可以通过检测血液中SAA的含量来判断感染是否发生及严重程度。

（4）白细胞介素6（IL-6）

白细胞介素6（IL-6）是白细胞介素的一种，其作为促炎细胞因子和抗炎性肌球蛋白起作用。人类中的IL-6由IL-6基因编码。此外，成骨细胞能够分泌IL-6以刺激破骨细胞形成，许多血管的中膜中的平滑肌细胞也产生IL-6作为促炎细胞因子。IL-6作为抗炎性肌球蛋白的作用是通过其对TNF-α和IL-1的抑制作用以及IL-1ra和IL-10的活化来介导的。其生物效应主要包括：①调节B细胞的生长和分化。②增强CTL、NK细胞的杀伤效应。③刺激造血干细胞的增生分化。④促进肝细胞合成急性相蛋白等，人体各个系统都有IL-6分泌细胞，因此，IL-6在维持机体生理平衡中具有十分重要的地位。已有大量实验资料表明，体内IL-6的异常与多种疾病有关。

（1）铁蛋白（Fer）

 铁蛋白是人体重要的铁贮存蛋白，参与对造血和免疫系统的调控。血清中铁蛋白水平可反映铁贮备情况及机体营养状态，它与多种疾病相关。

（2）维生素B12（VB12）

维生素B12又叫钴胺素，是含金属元素的维生素，也是一种需要一种肠道分泌物（内源因子）帮助才能被吸收的维生素。有的人由于肠胃异常，缺乏这种内源因子，即使膳食中来源充足也会患恶性贫血。维生素B12的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血；防止大脑神经受到破坏。

（3）叶酸（FA）

 叶酸是一种水溶性维生素，因绿叶中含量十分丰富而得名，又名喋酰谷氨酸。在自然界中有几种存在形式，其母体化合物是由喋啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸3种成分结合而成。叶酸对生物体的作用主要表现在以下几个方面：参与遗传物质和蛋白质的代谢；影响动物繁殖性能；影响动物胰腺的分泌；促进动物的生长；提高机体免疫力。叶酸缺乏的可能原因包括摄入量不足；需要量增加；肠道吸收障碍；维生素 C 缺乏；使用叶酸拮抗药；肝脏疾病等。

（4）维生素D2（VD2）

   维生素D2可以作为饮食补充剂来补充维生素D，VD2和皮肤在紫外线照射下产生的胆钙化醇（维生素D3）同样有效。维生素D2由小肠吸收，其吸收需胆盐与特殊α-球蛋白结合后转运到身体其他部位，贮存于肝和脂肪。代谢、活化首先通过肝脏，其次为肾脏。作用开始时间为12~24小时，治疗效应需10~14天。

（5）维生素D3（VD3）

   维生素D3主要是由人体自身合成的，人体的皮肤含有一种胆固醇，经阳光照射后，就变成了维生素D3。维生素D3还可来自动物性食物，如肝类，尤其是由海产类的鱼肝中提炼的鱼肝油。维生素D3除存在于少数动物性食物之外，主要是皮肤中的7-脱氢胆固醇经紫外线照射后形成的，而7-脱氢胆醇则是由胆固醇转变生成的，所以有人叫它太阳维生素。

（6）黄体酮（P）

 黄体酮（progesterone）又称孕酮激素、黄体激素，是卵巢分泌的具有生物活性的主要孕激素。黄体酮可以保护女性的子宫内膜，在女性怀孕期间，孕酮激素可以给胎儿的早期生长及发育提供支持和保障，而且能够对子宫起到一定的镇定作用。另外，孕酮激素和雌性激素的关系密不可分，两者都是相当重要的女性激素。雌性激素的作用主要是促使女性第二性征发育成熟，而孕酮激素则是在雌性激素作用的基础上，进一步促进第二性征的发育成熟，两者之间有协同作用。

（7）绒毛膜促性腺激素β (β-HCG)

 HCG是胎盘合体滋养层细胞所分泌的一种糖蛋白激素，它的主要功能是：维持黄体及降低母体淋巴细胞的活动，防止对胎儿的排斥反应。HCG结构中包括α、β两个亚基，β链为其独有，β亚基被用来制备特异性抗体测定血中的HCG，专名为β-HCG。HCG检测方法有多种，常用的有化学发光法、放射免疫法(RIA)和免疫金标试纸法等。

时间分辨荧光免疫层析定量检测技术平台

一、稀土元素发光特点

1、Stokes位移大

   Stokes位移达200nm,很容易分辨激发光和发射光，从而排除激发光干扰。而普通荧光物质荧光光谱的Stokes位移只有几十纳米，激发光谱和发射光谱通常有部分重叠，互相干扰严重；

2、衰变时间长

  镧系元素与普通的荧光团比较，镧系元素离子螯合物荧光的衰变时间（decay time）长（10～2000us），为传统荧光的103～106倍。通过时间分辨，可极大地降低了本底荧光,实现了高信噪比；

3、激发光谱宽而发射光谱窄

  镧系螯合物激发光光谱较宽，大的激发波长在300～500nm，可通过增加激发光能量来提高灵敏度。而发射光谱带很窄，甚至不到10nm，可采用只允许发射荧光通过的滤光片，进一步降低本底荧光，狭窄的发射波段为多次分析成为可能。

二、荧光纳米微球

  与经典的时间分辨荧光免疫分析方法DELFIA法不同，时间分辨荧光免疫层析技术采用荧光纳米微球作为标记物，每个微球中可包裹成千上万个荧光分子，大大提高了标记效率，有效的提高了灵敏度；同时纳米荧光微球表面修饰有合适密度的羧基，用于与蛋白或抗体的共价偶联，提高标记物的稳定性。

三、时间分辨荧光免疫层析（TRFILF）原理

  当将含有待测抗原（抗体）的样品滴在加样区，待测样品中的抗原（抗体）与结合垫中的荧光纳米微球标记的抗体（抗原）结合并通过毛细作用向前层析，当达到检测区后，与检测线上固定的抗体（抗原）结合，形成微粒-抗体-抗原-抗体夹心复合物并被固定在检测线上，而多余的荧光微球标记物继续向前层析，与固定在质控线二抗结合。反应结束后，用紫外光源（340nm）对检测区扫描检测，检测线和质控线上荧光纳米微球发出高强度的荧光（615nm），且衰变时间也较长。利用延缓测量时间，待样品基质中自然发生的短寿命荧光（1-10ns）全部衰变后，再测量稀土元素的特异性荧光，这样就可以完全排除特异本底荧光的干扰。通过检测线和质控线荧光强度的强弱及其比值，即可分析出样品中待测物的浓度。

四、时间分辨荧光免疫层析优势

✭ 灵敏度高，比金标、普通荧光灵敏度高2-3个数量级；

✭ 可定量检测，根据内置的标准曲线，可给出待测物的具体浓度；

✭ 标记物稳定，抗干扰强，检测结果重复性好；

✭ 操作简便，检测时间短，可用于现场筛查；

✭ 成本便宜，性价比高；

技术服务

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☛ 其它……

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一、心脑血管疾病的概述

   心脑血管疾病是心脏血管和脑血管疾病的统称，泛指由于高脂血症、血液黏稠、动脉粥样硬化、高血压等所导致的心脏、大脑及全身组织发生的缺血性或出血性疾病。具有发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高、并发症多的特点，严重危害人类健康，特别是50岁以上中老年人。即使应用目前先进、完善的治疗手段，仍可有50%以上的脑血管意外幸存者生活不能完全自理，全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人，居各种死因首位。

1、发病原因

   主要原因：心脑血管疾病主要原因是血管壁平滑肌细胞非正常代谢造成的，血管组织和人体的其他组织在一定周期内完成新陈代谢的过程，但是由于新的细胞组织不能正常的形成，使血管壁本身存在“缺陷”因此就容易产生炎症血管收缩不畅，随时都有阻塞或破裂的可能。血管是血液流通的重要通道，同时它也受神经系统的支配，因此神经系统不正常也能够导致供血的紊乱。

   次要原因：再者由于长时间饮食习惯问题，饮食中脂类过多，醇类过多。同时又没有合理的运动促进脂类醇类的代谢，导致体内脂类醇类物质逐渐增多；加上随着年龄增长，人体分泌抗氧化物酶能力减低，导致体内自由基水平升高，使血脂中的低密度脂蛋白胆固醇氧化后沉积在血管壁，久之使毛细血管堵塞，随着时间的推移，脂类醇类物质容易和体内游离的矿物质离子结合，形成血栓，产生心脑血管疾病。

2、主要症状

 心血管疾病，如冠心病的症状（包括心绞痛、心肌梗塞）：胸闷、心悸不宁、心慌气短；心率不齐；胸痛、胸骨后或心前区疼痛；气紧、晕厥、虚弱、嗳气；胸部刺痛、固定不移、入夜更甚；舌质紫暗、脉沉弦为主症的冠心病心绞痛、冠状动脉供血不足；上腹痛、恶心、呕吐；左后背痛、左手臂痛。

 脑血管疾病，如缺血性脑中风的症状（包括脑血栓、脑栓塞等）：偏瘫、偏身感觉障碍、偏盲、失语。或者交叉性瘫痪、交叉性感觉障碍、外眼肌麻痹、眼球震颤、吞咽困难、共济失调、眩晕等。肢体无力、麻木，面部、上下肢感觉障碍；单侧肢体运动不灵活；语言障碍，说话不利索；记忆力下降；看物体突然不清楚；眼球转动不灵活；小便失禁；平衡能力失调，站立不稳；意识障碍；头痛或者恶心呕吐；头晕、耳鸣。

二、 心脑血管相关的生物标志物

   临床检验中需要有效的生物标志物来进行诊断、危险分级进而指导治疗。

（1）脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）

脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）也叫做血小板活化因子乙酰水解酶，是一种炎性细胞分泌的能促使氧化磷脂水解的磷脂酶。分子量为45KD，由441个氨基酸组成。释放入血后会导致动脉粥样硬化斑块的形成，并使斑块变得脆弱、破裂，从而导致血栓及心血管事件的发生。它被认为是一种很好的心血管炎症状态的标志物。

（2）同型半胱氨酸（HCY）

 血同型半胱氨酸（HCY）简称血同，是一种含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的重要中间产物。正常情况下，血同型半胱氨酸在体内能被分解代谢，浓度维持在较低水平。但在日常生活中由于原发性原因和继发性原因会影响血同型半胱氨酸代谢导致血同型半胱氨酸浓度堆积升高。即高血同型半胱氨酸，简称高血同。会大幅增加冠心病、外周血管疾病及脑血管疾病的发病风险。因此，血同型半胱氨酸是一项重要的人体健康指标。

（3）肌钙蛋白I（cTnI）

 肌钙蛋白I（cTnI）是心肌肌肉收缩的调节蛋白心肌肌钙蛋白（cTn）的一种亚基。具有高度的心肌特异性，可用于急性心肌梗死的诊断、动态监测及疗效观察。对不稳定的心绞痛预后判断有极其重要的意义。可评估溶栓治疗的效果，还可作为溶栓治疗后再灌注成功与否的灵敏特异的指标。可确定围手术期有无急性心肌梗死或了解心脏及瓣膜手术时心脏保护措施是否得当。

（4）D-二聚体（D-Dimer）

 D-二聚体是最简单的纤维蛋白降解产物，D-二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块，主要反映纤维蛋白溶解功能，D-二聚体水平升高说明体内存在高凝状态和继发性的纤维蛋白溶解亢进。因此，D-二聚体质量浓度对血栓性疾病的诊断、疗效评估和预后判断具有重要的意义。D-二聚体的临床检测主要应用在静脉血栓栓塞（VTE）、深静脉血栓形成（DVT）和肺栓塞（PE）的诊断。

（5）N端脑利钠肽前体（NT-proBNP）

   N端脑利钠肽前体（NT-proBNP）是重要的心脏功能标志物，在临床上除了急、慢性心脏衰竭排除诊断的重要参数，对于心衰患者的预防筛查、疗效检测、预后评估及危险分层等方面均具有广泛应用。尤其在当下我国老龄化趋势愈加严重、心衰危险因素、流行增加造成心力衰竭发病率持续升高的背景下，NT-proBNP用于心衰高风险人群的筛查对于心衰的及时预防、早期发现及有效管理，从而降低心衰的发病率及死亡率具有重要意义。

（6）心梗三联（CK-MB/MYO/cTnI）

   心梗三联包括肌钙蛋白I（cTnI）、肌红蛋白（Myo）及肌酸激酶同工酶（CK-MB），在进行心肌损伤标志物检测时应该同步检测相关标志物。三种标志物释放的时间是不同的，同时快速测定三种标志物，较单独测定更方便、更快速，时间上同步更利于对结果的分析和判断，从而更能够做到快速准确的诊断。

（7）人心型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）

   心型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）是一种在心肌细胞质中多源性的小分子细胞内蛋白质，分子量为12-16ku，以各种游离形式存在于心肌细胞的胞浆内，参与心肌细胞内长链脂肪酸的转运。在正常人的血浆和尿液中含量极少，但当心肌细胞受损时，可快速释放至血液中，导致血液中h-FABP水平急剧升高。在AMI发生后可于1-2h立即升高，6h达高峰，并持续至12h，24h后回到正常值，且释放量与心肌损伤范围呈直接相关。

（8）载脂蛋白E（ApoE）

   载脂蛋白E（ApoE）是人体血浆中广泛存在的重要载脂蛋白之一，具有与脂质和受体结合的功能，在脂质代谢、维持胆固醇平衡中起到关键作用，同时也参与神经系统的正常发育生长过程及其损伤后修复。